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不同類型的熒光顯微鏡特點簡述
發布時間:2018-05-28   點擊次數:1012次

對于透(tou)射式(shi),在UV,U激發時一般用(yong)優良的(de)消色差物(wu)(wu)(wu)(wu)鏡(jing)(jing)即可(ke)(ke),在可(ke)(ke)見(jian)光(guang)B與G激發時,用(yong)半復消色差或(huo)復消色物(wu)(wu)(wu)(wu)鏡(jing)(jing)最為合適,用(yong)齊明(ming)(ming)(ming)物(wu)(wu)(wu)(wu)鏡(jing)(jing)也(ye)可(ke)(ke)以,雖然(ran)齊明(ming)(ming)(ming)物(wu)(wu)(wu)(wu)鏡(jing)(jing)象(xiang)場不平,然(ran)而高(gao)倍物(wu)(wu)(wu)(wu)鏡(jing)(jing)用(yong)于對邊緣分辨力要(yao)求(qiu)不高(gao)的(de)試(shi)樣。一般中等以下倍率,干物(wu)(wu)(wu)(wu)鏡(jing)(jing)適用(yong)于暗(an)場照(zhao)(zhao)明(ming)(ming)(ming)。高(gao)倍率的(de)浸液物(wu)(wu)(wu)(wu)鏡(jing)(jing)不適合暗(an)場照(zhao)(zhao)明(ming)(ming)(ming),因(yin)為暗(an)場聚光(guang)鏡(jing)(jing)照(zhao)(zhao)明(ming)(ming)(ming)錐光(guang)束會進入(ru)物(wu)(wu)(wu)(wu)鏡(jing)(jing)。浸液式(shi)物(wu)(wu)(wu)(wu)鏡(jing)(jing)比(bi)干鏡(jing)(jing)頭更適宜作落射照(zhao)(zhao)明(ming)(ming)(ming),因(yin)為空氣—玻璃(li)界面(mian)反射光(guang)遠比(bi)玻璃(li)—浸液界面(mian)反射光(guang)多。熒光(guang)顯微鏡(jing)(jing)

       (2)激(ji)發光(guang)(guang)不必透過(guo)載玻片,因而(er)減少損失,而(er)且激(ji)發光(guang)(guang)與熒光(guang)(guang)對物鏡而(er)言(yan)方向相反,分得很開不可能(neng)產生互相干擾,就是有部分反射激(ji)發光(guang)(guang)進入物鏡后(hou)也被(bei)二向色(se)分光(guang)(guang)鏡反射至(zhi)光(guang)(guang)源,僅有極小部分透過(guo),使截止濾色(se)片負擔小,可制成較薄的片;

  (1)物鏡兼作聚光鏡,就沒有聚光鏡的定中與調焦問題,而且物鏡的數值孔徑隨倍率而增大,熒光圖像亮度也隨之提高;
   
  (4)落射熒光的物鏡因要通過紫外區光譜,因此必須要考慮紫外段的透過率,為此專門研制UV2F透紫外區熒光物鏡系列,而透射式則不必。
  
  
  (3)用透(tou)射(she)式激發時,大(da)部分熒(ying)光(guang)產(chan)生于切片(pian)(pian)底部,必須透(tou)過切片(pian)(pian)射(she)出,而且還會產(chan)生散射(she)。而落射(she)照(zhao)明和(he)觀察面(mian)在同一表面(mian),熒(ying)光(guang)圖象亮度毫無(wu)損耗,而且對象質也無(wu)影(ying)響,特(te)別對厚(hou)的(de)切片(pian)(pian),如菌落和(he)組織培養等更(geng)具有獨特(te)的(de)功能;偏光(guang)顯微鏡(jing)

  對于目鏡沒有特殊要求。
  
  由兩種基本形式組合,具有更大機動性,適應各種研究需要。
  
  熒(ying)(ying)光(guang)(guang)檢(jian)測自1908年(nian)第一(yi)臺熒(ying)(ying)光(guang)(guang)顯(xian)(xian)(xian)微(wei)鏡(jing)問世以來,不斷地得到改進(jin)和(he)完(wan)善。高壓汞燈(deng)的(de)(de)出(chu)現(xian);多層鍍(du)膜技術滿足了激發(fa)和(he)截止(zhi)濾色(se)片的(de)(de)要求;高性(xing)能(neng)優質光(guang)(guang)學系統的(de)(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)顯(xian)(xian)(xian)微(wei)鏡(jing)出(chu)現(xian),也促使(shi)了80年(nian)代(dai)免疫熒(ying)(ying)光(guang)(guang)的(de)(de)發(fa)展(zhan)(zhan)。90年(nian)代(dai)問世的(de)(de)激光(guang)(guang)掃(sao)描共焦顯(xian)(xian)(xian)微(wei)鏡(jing)能(neng)進(jin)行熒(ying)(ying)光(guang)(guang)圖像分(fen)析,測定(ding)(ding)細胞(bao)內的(de)(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)分(fen)布(bu)和(he)組織切(qie)片的(de)(de)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)分(fen)布(bu)測定(ding)(ding);還可實時獲得相(xiang)襯—熒(ying)(ying)光(guang)(guang)重疊圖像和(he)雙重熒(ying)(ying)光(guang)(guang)標記的(de)(de)原色(se)圖像,它是在熒(ying)(ying)光(guang)(guang)顯(xian)(xian)(xian)微(wei)鏡(jing)基礎上(shang)發(fa)展(zhan)(zhan)起來的(de)(de)光(guang)(guang)、機、電、算一(yi)體化的(de)(de)新(xin)一(yi)代(dai)產品。跨入(ru)新(xin)世紀后,熒(ying)(ying)光(guang)(guang)檢(jian)測和(he)熒(ying)(ying)光(guang)(guang)顯(xian)(xian)(xian)微(wei)鏡(jing)將會得到更(geng)迅猛的(de)(de)發(fa)展(zhan)(zhan)。

   圖中(zhong)透(tou)射(she)(明場或暗(an)場)用(yong)來(lai)搜(sou)索定位,也可以用(yong)來(lai)比較熒(ying)光(guang)部(bu)位和(he)(he)不發熒(ying)光(guang)部(bu)位的細微結構(gou);(d)和(he)(he)(e)也有相(xiang)同的功能。(d)中(zhong)使用(yong)相(xiang)襯(chen)時,要用(yong)相(xiang)襯(chen)物鏡,交(jiao)替進行(xing)(xing)熒(ying)光(guang)觀(guan)(guan)察(cha)和(he)(he)相(xiang)襯(chen)觀(guan)(guan)察(cha),進行(xing)(xing)比較;(e)中(zhong)偏(pian)光(guang)觀(guan)(guan)察(cha)適(shi)用(yong)于(yu)雙折射(she)物質(zhi),(c)中(zhong)落(luo)射(she)熒(ying)光(guang)和(he)(he)透(tou)射(she)熒(ying)光(guang)的組合適(shi)用(yong)于(yu)雙重(zhong)染色,如同時進行(xing)(xing)FITC和(he)(he)TRITC雙重(zhong)染色,則(ze)可用(yong)落(luo)射(she)觀(guan)(guan)察(cha)TRITC,用(yong)透(tou)射(she)觀(guan)(guan)察(cha)FITC標識過的部(bu)位。 




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